Avainero - virtaussytometria vs. FACS

Soluteorian yhteydessä solut ovat kaikkien elävien organismien perusrakenteellinen ja toiminnallinen yksikkö. Solujen lajittelu on menetelmä, jota käytetään erottamaan eri solut fysiologisten ja morfologisten ominaisuuksien mukaan. Niillä voi olla solunsisäisiä tai solunulkoisia ominaisuuksia. DNA: n, RNA: n ja proteiinien vuorovaikutusta pidetään solunsisäisinä interaktiivisina ominaisuuksina, kun taas muotoa, kokoa ja erilaisia ​​pintaproteiineja pidetään solunulkoisina ominaisuuksina. Nykyajan tieteessä solujen lajittelumenetelmät ovat johtaneet avuksi erilaisiin tutkimuksiin biologisissa tutkimuksissa ja myös uusien periaatteiden luomiseen lääketutkimuksen avulla. Solujen lajittelu tapahtuu erilaisilla menetelmillä, jotka sisältävät sekä primitiivisiä vähemmällä laitteella että edistyneitä teknologisia menetelmiä käyttämällä hienostuneita koneita. Virtaussytometria, fluoresoiva aktivoitu solujen lajittelu (FACS), magneettinen solujen valinta ja yksisoluinen lajittelu ovat tärkeimmät menetelmät, joita käytetään. Virtaussytometria ja FACS on kehitetty erottamaan solut niiden optisten ominaisuuksien mukaan. FACS on erikoistunut virtaussytometria. Virtaussytometria on menetelmä, jota käytetään heterogeenisen solupopulaation analysoinnissa eri solupinnan molekyylien, koon ja tilavuuden mukaan, mikä mahdollistaa yksittäisten solujen tutkinnan. FACS on prosessi, jossa näytteiden soluseos lajitellaan niiden valonsironnan ja fluoresenssin ominaisuuksien perusteella kahteen tai useampaan säiliöön. Tämä on avainero virtaussytometrian ja FACS: n välillä.

SISÄLLYS

1. Yleiskatsaus ja keskeiset erot 2. Mikä on virtaussytometria 3. Mikä on FACS 4. Virtaussytometrian ja FACS: n samankaltaisuudet 5. Vertailu rinnakkain - virtaussytometria vs. FACS taulukkomuodossa 6. Yhteenveto

Mikä on virtaussytometria?

Virtaussytometria on menetelmä, jota käytetään tutkimaan ja määrittämään solunsisäisten molekyylien ja solun pinnan ilmentyminen sekä määrittelemään ja karakterisoimaan erilliset solutyypit. Sitä käytetään myös solumäärän ja solukokojen määrittämisessä ja eristettyjen alaryhmien puhtauden arvioinnissa. Tämä mahdollistaa yksittäisten solujen moniparametrisen arvioinnin suunnilleen samaan aikaan. Virtaussytometriaa käytetään mittaamaan fluoresenssin voimakkuutta, joka syntyy fluoresoivasti leimattujen vasta-aineiden johdosta, jotka auttavat tunnistamaan proteiineja tai ligandeja, jotka sitoutuvat assosioituneisiin soluihin.

Yleensä virtaussytometria sisältää pääasiassa kolme alajärjestelmää. Ne ovat fluideja, elektroniikkaa ja optiikkaa. Virtaussytometriassa on saatavana viisi pääkomponenttia, joita käytetään solujen lajitteluun. Ne ovat virtauskenno (nestevirta, jota käytetään niiden kuljettamiseen ja kennojen kohdistamiseen optista mittausprosessia varten), mittausjärjestelmä (voi olla eri järjestelmiä, mukaan lukien elohopea- ja ksenonlamput, suuritehoiset vesijäähdytteiset tai pienitehoiset ilmajäähdytteiset laserit tai diodilaserit), ADC; Analoginen digitaalimuunnin, vahvistusjärjestelmä ja tietokone analyysiä varten. Hankinta on prosessi, jolla tiedot kerätään näytteistä virtaussytometrillä. Tätä prosessia välittää tietokone, joka on kytketty virtaussytometriin. Tietokoneessa oleva ohjelmisto analysoi tietokoneelle syötetyt tiedot virtaussytometristä. Ohjelmistolla on myös kyky säätää virtaussytometriä säätelevän kokeen parametreja.

Mikä on FACS?

Virtaussytometrian yhteydessä fluoresenssiaktivoitu solujen lajittelu (FACS) on menetelmä, jota käytetään erottamaan ja lajittelemaan näyte biologisten solujen seoksesta. Solut erotetaan kahdesta tai useammasta astiasta. Lajittelumenetelmä perustuu solun fysikaalisiin ominaisuuksiin, joihin sisältyy solun valonsironta- ja fluoresenssiominaisuudet. Tämä on tärkeä tieteellinen tekniikka, jota voidaan käyttää saamaan luotettavia kvantitatiivisia ja laadullisia tuloksia jokaisesta solusta emittoiduista fluoresenssisignaaleista. FACS: n aikana aluksi ennalta saatu soluseos; suspensio on suunnattu kapean nestevirran keskelle, joka virtaa nopeasti. Nestevirtaus on suunniteltu erottamaan suspensiossa olevat solut kunkin kennon halkaisijan perusteella. Suspensiovirtaan kohdistetaan värähtelymekanismi, joka johtaa yksittäisten pisaroiden muodostumiseen.

Järjestelmä kalibroidaan yhden pisaran muodostamiseksi yhdellä solulla. Juuri ennen pisaroiden muodostumista virtaussuspensio liikkuu fluoresenssin mittauslaitetta pitkin, joka havaitsee kunkin solun fluoresenssin ominaisuudet. Pisaroiden muodostumispaikkaan asetetaan sähköinen varausrengas, jonka varaus indusoidaan renkaaseen ennen fluoresenssin voimakkuuden mittaamista. Kun pisarat on muodostettu suspensiovirrasta, pisaroihin jää varaus, joka siirtyy sitten sähköstaattiseen taipumajärjestelmään. Maksun mukaan järjestelmä suuntaa pisarat erilaisiin astioihin. Latauksen soveltamismenetelmä vaihtelee FACS: ssä käytettyjen järjestelmien mukaan. FACS: ssä käytetty laite tunnetaan fluoresenssilla aktivoiduna solulajittelijana.

Mikä on virtaussytometrian ja FACS: n samankaltaisuus?


  • Virtaussytometria ja FACS on kehitetty erottamaan solut niiden optisten ominaisuuksien mukaan.

Mitä eroa virtaussytometrialla ja FACS: llä on?

Yhteenveto - virtaussytometria vs. FACS

Solu on kaikkien elävien organismien perusrakenteellinen ja toiminnallinen yksikkö. Solujen lajittelu on prosessi, jolla solut eristetään ja eriytetään eri luokkiin niiden solunsisäisten ja solunulkoisten ominaisuuksien perusteella. Virtaussytometria ja FACS ovat kaksi tärkeätä menetelmää solujen lajittelussa. Molemmat prosessit on kehitetty erottamaan solut niiden optisten ominaisuuksien mukaan. Virtaussytometria on menetelmä, jota käytetään heterogeenisen solupopulaation analysoinnissa eri solupinnan molekyylien, koon ja tilavuuden mukaan, mikä mahdollistaa yksittäisten solujen tutkinnan. FACS on prosessi, jossa näytteiden soluseos lajitellaan niiden valonsironnan ja fluoresenssin ominaisuuksien perusteella kahteen tai useampaan säiliöön. Tämä on ero virtaussytometrian ja FACS: n välillä.

Lataa PDF-versio Flow Cytometry vs FACS -sovelluksesta

Voit ladata tämän artikkelin PDF-version ja käyttää sitä offline-tarkoituksiin lainaushuomautuksen mukaisesti. Lataa PDF-versio täältä Ero virtaussytometrian ja FACS: n välillä

Viite:

  1. Virtaussytometria (FCM) / FACS | Fluoresenssiaktivoitu solujen lajittelu (FACS). Saavutettu 22. syyskuuta 2017. Saatavilla täällä Ibrahim, Sherrif F. ja Ger van den Engh. "Virtaussytometria ja solujen lajittelu." SpringerLink, Springer, Berliini, Heidelberg, 1. tammikuuta 1970. Saavutettu 22. syyskuuta 2017. Saatavilla täältä

Kuvan kohteliaisuus:


  1. 'Sytometri'By Kierano - Oma työ, (CC BY 3.0) Commons Wikimedian kautta' Fluoresenssi-avusteinen solulajittelu (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) In vitro -mallijärjestelmän kehittäminen Equus caballuksen vuorovaikutuksen tutkimiseksi IgE sen korkea-affiniteettisen FcεRI-reseptorin kanssa (PhD thesis), Sheffieldin yliopisto, (CC BY-SA 3.0) Commons Wikimedian kautta